张昊;蔡佩芝;赵东林*;沈曾民
肖士洁1 ;昌志龙1 ;童元建1 ;徐樑华1* ;陈标华2
翟尚儒;陈传东;安庆大*;宋宇;翟滨
根据已知的放射性土壤杆菌体内的D-甘露糖异构酶(Fmi)氨基酸序列,设计适合在大肠杆菌内表达的Fmi基因序列(1245bp),采用体外基因拼接合成。构建了表达Fmi的重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET30-Fmi,诱导表达的Fmi蛋白经SDS-PAGE验证为可溶性蛋白,分子量44000。通过实验优化了Fmi的催化条件,结果表明Fmi催化的最适pH值为7.5,最适温度为45℃,催化1h酶活达5.29U/mL。以25%的果糖溶液为底物时,催化2h果糖转化率达29.4%。
王兴华;张傑*;黄崇品